セル経由 – ウィキペディア

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セルバイライティ （ セルライフ 、 生きている細胞 、 英語 細胞生存率 ）細胞生物学および微生物学では、細胞集団の生細胞の割合を示します。

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死んだ細胞の数と生細胞の数（ 生きている細胞数 ）セルの総数。細胞の総数は、例えばB.フローサイトメーターまたはコールターカウンターを使用して、顕微鏡下のカウントチャンバーで決定できます。細胞は、壊死とアポトーシスの2つのメカニズムを介して死です。一方、重要な色は、性を介して細胞を決定する方法ではありませんが、細胞を殺さずに色を着色するプロセスを示します。

IC 50 値（英語 半最大効果の阻害濃度 ）細胞毒性の検査の場合、物質の濃度を示します。一部の出版物では、LCもそうです 50 値（英語 致死 それ以外の 阻害 ）ただし、このコンテキストで使用されていますが、ICと同じ 50 -価値がある。この値は、たとえば、化学療法や消毒剤の有効性にとって興味深いものです。必要な濃度や線量が小さいほど、有効性が高くなります。

さまざまな測定原則に従って機能する市場でのセルを介したセルを決定するためのさまざまなテストです。 [初め] この方法には、顕微鏡、蛍光、比色、ルミノメトリック、フローサイトメトリックおよびインピーダル変化ベースの方法が含まれます。コロニー微生物の場合、通常、表面生存可能なカウントが実行されます。

吸血性の証拠は、エンドサイトーシス、酵素活性、細胞膜の完全性、または乗算などの生細胞の特性に基づいています。各方法には弱点があるため、次のようなアポトーシスと壊死の同時検出のために部分的に蛍光二重色が実行されます。 B.ヨウ化プロピジウム（PI）とアネキシンVによる重要な蛍光二重色（以下を参照）。アネキシンVとPIを含む二重色の細胞は死んだ細胞を示し、単にPI色の細胞は壊死性および単に併合された細胞として分類されます。以下では、リストされている証拠が生細胞または死細胞のいずれかを検出することに注意する必要があります。

エンドサイトーシス [ 編集 | ソーステキストを編集します ]

たとえば、このv。 ニュートラルな赤い取り込み 、 いいえ ）エンドサイトーシスにより細胞リソソームに表示されます。 [2]

酵素的証拠 [ 編集 | ソーステキストを編集します ]

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フルオレセインジアセタによるエステラセニック証拠

さらに、死んだ細胞で減少する酵素活性の証拠はまだ実行できます。したがって、これらの証拠は主に生細胞を色付けしています。

カルセインオンまたはフルオレセインジアセテート [3] 使用済み。乳酸デヒドロゲナーゼ（LDH）の活性も測定できます。

酸化還元インジケーターレサズリン [4] [5] 、ヒドロエチジン [6] 、Der MTT-TEST MIT 3-（4,5-ジメチル-2-チアゾリル）-2,5-ジフェニル-2H-テトラゾリウムブロミド [2] [7] [8] または彼のアナログXTTとルシフェラーゼベースの手順 [9] 酸化還元電位に関する生細胞の解糖を表示します。

ブロムデソオキシウリジン（BRDU）は、成長細胞のDNA複製を検出するために使用されます。 [十]

WST-1-ASSAY（ の アター s ruble t エトラゾリウム ）細胞内の無傷の呼吸鎖を検出するのに役立ちます。 [2] [11] 無傷のミトコンドリアコキサットテトラゾリウムデヒドロゲナーゼ系を持つ生存性細胞は、弱い赤色のテトラゾリウム塩WST-1（4-（4-ヨードフェニル）-2-（4-ニトロフェニル）-2H-5-テトラゾリオ赤色の形状の酵素的実装を引き起こします。この色のエンベロープは、スペクトル測光装置のスペクトル測光計で測定および評価できます。 [12番目] 。

増殖の証明 [ 編集 | ソーステキストを編集します ]

特定の期間の成長細胞の増加の測定により、成長率と生成時間がVを決定することができます。

総タンパク質証明 [ 編集 | ソーステキストを編集します ]

すべての細胞のタンパク質のケナシド青色の色は、他の方法との限られた相関しかありません。 [13] [14]

アポトーシス [ 編集 | ソーステキストを編集します ]

アポトーシスの証拠は、アネキシンVでYo-Proで使用できます [6] または、Tunelメソッドを使用します。すべての死んだ細胞がアポトーシスを受けているわけではありませんが、機械的過負荷の場合、細胞は細胞膜の亀裂で死亡します（壊死を参照）。

穿孔証拠 [ 編集 | ソーステキストを編集します ]

死んだ細胞のトリパン床

拡散ベースのプロセスは、穿孔染料を使用しますトリパンブルー、 [15] BrillantBlau FCF、 [2] クリスタルバイオレットまたはDNAインターカレーティング蛍光色素4 ‘、6-ジアミジン-2-フェニルインドール（DAPI）、 [16] エチジウムブロミッドオーデルプロピジウムヨウ素、 [16] それは、穿孔された細胞膜を介して細胞膜に浸透する可能性があります。生細胞はほとんど着色されていません。 （大幅に低いが）色素拡散のため、穿孔の証明は、生きている無傷の細胞でさえ染料を添加した後、急速なカウントを必要とする必要があります。

  1. ↑ 細胞の生存率と増殖を決定するための測定方法の概要
  2. ↑ a b c d L.Schröterová、V。Králová、A。Vorace、P。Hasková、E。Rudolf、M。Cervinka：結腸癌細胞におけるセレン化合物の抗増殖効果：異なる細胞毒性アッセイの比較。の： トキシコールvitro。 （2009）bd。 23（7）、S。1406–1411。 PMID 19607906 。
  3. ↑ D. W. R.グレイ、 et al。 ：ランゲルハンの孤立した島の生存率染色としてのフルオレセインジアセテートと臭化エチジウムの使用。の： ステインテクノロジー 62/1987 S. 373–381。
  4. ↑ E. M. Czekanska：レサズリンベースの蛍光色素による細胞増殖の評価。の： 方法mol biol。 （2011）bd。 740、S。27–32。 PMID 21468965 。
  5. ↑ E. Matteucci、O。Giampietro：白血球機能のフローサイトメトリー研究：方法の分析的比較と臨床研究への適用性。の： Curr Med Chem。 （2008）bd。 15（6）、S。596–603。レビュー。 PMID 18336274 。
  6. ↑ a b C. Mehanna、C。Baudouin、F。Brignole-Baudouin：酸化ストレスとアポトーシスのための分光蛍光測定アッセイ、同じマイクロプレート上の細胞生存率：マルチパラメトリック分析と品質制御。の： in vitroでのトキシコール。 （2011）bd。 25（5）、S。1089–1096。 PMID 21419213 。
  7. ↑ V. N.スマントラン：細胞化学感受性アッセイ：概要。の： 方法mol biol。 （2011）bd。 731、S。219–36。 PMID 21516411 。
  8. ↑ ビトロ内テストの紹介 （ 記念 2007年6月13日から インターネットアーカイブ ））
  9. ↑ M. C.ディディオ、S。セラフィーニ、M。J。ファイファー、F。J。キング、C。N。パーカー： 多重レポーター遺伝子アッセイ：ルシフェラーゼ活性に関する細胞生存率と化合物の速度論の監視 。の： J Biomolスクリーン。 （2011）bd。 16（7）、S。786–93。 PMID 21693766 。
  10. ↑ Y. Lu、F。Jiang、H。Jiang、K。Wu、X。Zheng、Y。Cai、M。Katakowski、M。Chopp、S。S。To：Gall酸は、セルビビリティ、増殖、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、プロリフィオン、ヒト神経膠腫細胞におけるition、出て、血管誘発。の： Eur J Pharmacol。 （2010）bd。 641（2-3）、S。102–7。 PMID 20553913 。 PMC 3003697 （無料の全文）。
  11. ↑ A. V.ペスキン、C。C。ウィンターボーン： 水溶性テトラゾリウム塩（WST-1）を使用したスーパーオキシドジスムターゼのマイクロタイタープレートアッセイ。 の： ACTA化学クリニック。 bd。 293、2000、S。157–166。 PMID 10699430 。
  12. ↑ Zimmermann I.、 急性骨髄性白血病における側副化学感受性 /耐性 、論文2006、LMUミュンヘン
  13. ↑ R. Clothier、E。Gottschalg、S。Casati、M。Balls：The Frame Alternatives Laboratory Database。 1.ケナシドブルー総タンパク質アッセイによって決定されるin vitro基底細胞毒性。の： Alst Lab Anim。 （2006）bd。 34（2）、S。151–75。 PMID 16704290 。
  14. ↑ H. Hurst、R。H. Clothier、M。Pratten：盲検試験におけるテラトゲンの識別のためのひよこ筋細胞マイクロマスシステムの評価。の： トキシコールを再現します。 （2009）bd。 28（4）、S。503–10。 PMID 19646523 。
  15. ↑ M. J. Stoddart：細胞生存率アッセイ：はじめに。の： 方法mol biol。 （2011）bd。 740、S。1–6。 PMID 21468961 。
  16. ↑ a b P. Chrenek、A。V. Makarevich、M。Simon：トランスジェニックウサギの精子における生存率とアポトーシス。の： 接合。 （2012）bd。 20（1）、S。33–7。 PMID 21144118 。

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