Huyết thanh bò bào thai – Wikipedia

Posted on by lordneo

Huyết thanh bò bào thai ( FBS ) xuất phát từ máu lấy từ bào thai bò qua hệ thống thu gom khép kín tại lò mổ. Huyết thanh bò bào thai là huyết thanh được sử dụng rộng rãi nhất – bổ sung cho nuôi cấy tế bào in vitro của tế bào nhân chuẩn. Điều này là do nó có mức độ kháng thể rất thấp và chứa nhiều yếu tố tăng trưởng, cho phép tính linh hoạt trong nhiều ứng dụng nuôi cấy tế bào khác nhau.

Protein hình cầu, albumin huyết thanh bò (BSA), là thành phần chính của huyết thanh bò bào thai. Sự đa dạng của protein trong huyết thanh bào thai duy trì các tế bào nuôi cấy trong một môi trường mà chúng có thể tồn tại, phát triển và phân chia.

FBS không phải là thành phần truyền thông được xác định đầy đủ và do đó có thể khác nhau về thành phần giữa các lô. [1] Do đó, phương tiện truyền thông không có hóa chất và xác định hóa học (CDM) đã được phát triển như một vấn đề của thực hành phòng thí nghiệm tốt. [19659005] Sản xuất [ chỉnh sửa ]

Huyết thanh bò bào thai là sản phẩm phụ của ngành công nghiệp sữa. Huyết thanh bò bào thai, như với phần lớn huyết thanh động vật được sử dụng trong nuôi cấy tế bào, được sản xuất từ ​​máu thu thập tại các lò mổ thương mại từ bò sữa cũng cung cấp thịt cho con người.

Giai đoạn đầu tiên của quy trình sản xuất huyết thanh bò bào thai là thu hoạch máu từ bào thai bò sau khi thai nhi được lấy ra khỏi con bò bị giết mổ. Máu được thu thập vô trùng vào một hộp chứa vô trùng hoặc túi máu và sau đó được cho phép đông máu. Phương pháp thu thập thông thường là chọc thủng tim, trong đó kim được đưa vào tim. Điều này giảm thiểu "nguy cơ ô nhiễm huyết thanh với vi sinh vật từ chính thai nhi và môi trường". [4] Sau đó, nó được ly tâm để loại bỏ cục máu đông fibrin và các tế bào máu còn lại từ huyết thanh màu vàng trong suốt. Huyết thanh được đông lạnh trước khi chế biến thêm là cần thiết để làm cho nó phù hợp cho nuôi cấy tế bào.

Giai đoạn thứ hai của quá trình xử lý bao gồm lọc, thường sử dụng chuỗi lọc với lần lọc cuối cùng là bộ lọc màng 0,1 micromet vô trùng. Khi được xử lý bởi một nhà cung cấp huyết thanh thương mại có uy tín, huyết thanh bào thai tiệt trùng phải được kiểm tra kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt và được cung cấp Giấy chứng nhận phân tích chi tiết. Giấy chứng nhận cho kết quả xét nghiệm đầy đủ và thông tin liên quan đến nguồn gốc của huyết thanh. Chứng nhận Phân tích khác nhau giữa các nhà cung cấp thương mại, nhưng mỗi loại thường bao gồm các chi tiết sau: tuyên bố lọc, nước xuất xứ, kiểm tra hiệu suất tăng trưởng tế bào, xét nghiệm vô trùng vi khuẩn, sàng lọc mycoplasma và virus, endotoxin, hemoglobin, IgG và tổng số protein.

Các câu hỏi đạo đức đã được đặt ra liên quan đến quá trình lấy máu do những đau khổ tiềm ẩn gây ra cho thai nhi. Mặc dù anoxia hoặc giết mổ tích cực có thể được sử dụng để gây bất tỉnh hoặc tử vong trước khi thu hoạch huyết thanh, việc tiếp xúc với bê non còn sống với oxy có thể khiến chúng nhận thức được trước khi bị giết, [2] dẫn đến tranh luận tích cực về đạo đức của việc thu hoạch huyết thanh. [19659013] Huyết thanh sử dụng [ chỉnh sửa ]

Huyết thanh bào thai có sẵn trên thị trường từ nhiều nhà sản xuất và vì các tế bào được nuôi cấy in vitro rất nhạy cảm, khách hàng thường kiểm tra các lô cụ thể để kiểm tra sự phù hợp của chúng loại tế bào cụ thể. Ví dụ, khi thay đổi từ lô này sang lô khác, người ta thường thích ứng các tế bào với lô nguyên liệu mới, bằng cách trộn 50% huyết thanh cũ với 50% huyết thanh mới và cho phép các tế bào thích nghi với vật liệu mới.

Huyết thanh được lưu trữ đông lạnh để bảo vệ sự ổn định của các thành phần như các yếu tố tăng trưởng. Khi huyết thanh tan băng, một số lượng mưa có thể được nhìn thấy. Đây là một hiện tượng bình thường và nó không làm giảm chất lượng của huyết thanh theo bất kỳ cách nào. Kết tủa có thể được loại bỏ bằng cách chuyển huyết thanh vào các ống vô trùng và ly tâm trong 5 phút ở 400 × g .

Để hạn chế lượng mưa, khuyến cáo rằng huyết thanh được làm tan trong tủ lạnh ở 2-8˚C. Huyết thanh nên được trộn thường xuyên trong quá trình này. Nên tránh các chu kỳ đóng băng / tan băng lặp đi lặp lại và nên phân phối huyết thanh thành các phần sử dụng một lần trước khi đông lạnh.

Các vấn đề kỹ thuật [ chỉnh sửa ]

FBS chứa một loạt các thành phần protein phức tạp được nhiều tế bào yêu cầu để phát triển, đó là lý do tại sao nó được sử dụng thành công trong nuôi cấy tế bào. Thật không may, một lượng lớn protein không xác định có thể dẫn đến sự kích thích không mong muốn của các tế bào. Đây là lý do tại sao 'đói trong huyết thanh' thường được sử dụng trong các thí nghiệm trong đó cần phải đo những thay đổi tinh tế trong biểu hiện cytokine. [6] Đây là nơi FBS có thể được sử dụng để duy trì các tế bào nhưng trước khi thí nghiệm, huyết thanh được loại bỏ khi đi qua các tế bào để bình thường hóa biểu hiện cytokine. Một cách tiếp cận khả thi khác là sử dụng FBS tước than mà dường như không kích thích tế bào trong nuôi cấy, đồng thời, hỗ trợ sự phát triển của các lớp tế bào khỏe mạnh. [7]

Lịch sử nguồn [ chỉnh sửa ]

Huyết thanh được sản xuất để sử dụng trong ngành công nghiệp công nghệ sinh học và các lĩnh vực nghiên cứu được quy định cao. Bộ sưu tập và chuyển động của tất cả các sản phẩm có nguồn gốc động vật trên toàn cầu được kiểm soát chặt chẽ. Kiểm soát thú y đối với các sản phẩm có nguồn gốc động vật phần lớn tuân theo các quy định do EU (DG SANCO) và Hoa Kỳ (USDA) đặt ra. Quy định hiện hành về việc nhập khẩu phụ phẩm động vật vào EU được quy định trong Quy định (EU) 1069/2009 và Quy định thực hiện Quy định (EU) 142/2011.

FBS là một sản phẩm được thu thập trên toàn thế giới với các bộ sưu tập chính được tập trung ở Hoa Kỳ, Úc, New Zealand, nơi nó cũng được tiêu thụ theo truyền thống như một thức uống dành cho lứa tuổi thanh thiếu niên, Canada, Trung Mỹ, Nam Mỹ và Châu Âu.

Doanh số toàn cầu [ chỉnh sửa ]

Doanh số của FBS trong năm 2008 được ước tính là 700.000 lít trên toàn cầu.

Nhà sưu tập, nhà sản xuất và người dùng cuối của FBS trên toàn cầu là thành viên của ISIA, Hiệp hội Công nghiệp Huyết thanh Quốc tế. Các công ty thành viên được liệt kê trên trang web ISIA. Chi tiết liên lạc đầy đủ có sẵn thông qua cổng thông tin này và ISIA có thể trả lời bất kỳ câu hỏi nào liên quan đến việc thu thập và sử dụng tài nguyên quan trọng này.

Hiệp hội Công nghiệp Huyết thanh Quốc tế được thành lập vào tháng 6 năm 2006 để tự điều chỉnh một ngành công nghiệp không đạt tiêu chuẩn trước đây. Tuyên bố sứ mệnh của ISIA nêu rõ: ISIA sẽ thiết lập, thúc đẩy và đảm bảo tuân thủ các tiêu chuẩn xuất sắc và đạo đức không thỏa hiệp trong thực tiễn kinh doanh của ngành công nghiệp cung cấp sản phẩm từ huyết thanh và động vật toàn cầu. Trọng tâm chính của chúng tôi sẽ là sử dụng an toàn và an toàn các sản phẩm có nguồn gốc từ huyết thanh và động vật thông qua truy xuất nguồn gốc thích hợp, sự thật trong ghi nhãn và tiêu chuẩn hóa và giám sát phù hợp. [[909090] Xem thêm [ chỉnh sửa ] ] Tài liệu tham khảo [ chỉnh sửa ]

  1. ^ Van Der Valk, Jan; Bieback, K.; Buta, C.; Cochrane, B.; Dirks, W. G.; Fu, J.; Hickman, J. J.; Hohensee, C.; Kole, R.; Liebsch, M.; Pistollato, F.; Schulz, M.; Thieme, Đ.; Weber, T.; Wiest, J.; Nháy mắt, S.; Gstraunthaler, G. (2018). "Huyết thanh bò bào thai (FBS): Quá khứ – hiện tại – tương lai". Altex . 35 (1): 99 Điêu118. doi: 10.14573 / altex.1705101. PMID 28800376.
  2. ^ a b van der Valk, J.; Ngăm ngăm, D. De Smet, K. (2010). "Tối ưu hóa môi trường nuôi cấy tế bào được xác định hóa học – Thay thế huyết thanh bò bào thai bằng phương pháp in vitro động vật có vú". Độc tính trong Vitro . 24 (4): 1053 Tiết1063. doi: 10.1016 / j.tiv.2010.03.016. hdl: 1874/191398. PMID 20362047.
  3. ^ Yao, Tatsuma; Asayama, Yuta (2017). "Phương tiện nuôi cấy tế bào động vật: Lịch sử, đặc điểm và các vấn đề hiện tại". Y học sinh sản và sinh học . 16 (2): 99 Tái 117. doi: 10.1002 / rmb2.12024. PMC 5661806 . PMID 29259457.
  4. ^ a b Jochems, C; et al. (2002). "Việc sử dụng huyết thanh bào thai: Vấn đề đạo đức hay khoa học?". Các lựa chọn thay thế cho động vật thí nghiệm . 30 (2): 219 Công thức . Truy cập 16 tháng 5 2018 .
  5. ^ Mellor DJ, Gregory NG (2003). "Phản ứng, kích thích hành vi và nhận thức ở cừu con và thai nhi: ý nghĩa thực nghiệm, thực tế và trị liệu". Tạp chí thú y New Zealand . 51 (1): 2 trận13. doi: 10.1080 / 00480169.2003.36323. PMID 16032283.
  6. ^ Chowdhury, P; Bao tải, SH; Sheerin, NS (tháng 8 năm 2006). "Các thụ thể giống như TLR2 và TLR4 bắt đầu phản ứng miễn dịch bẩm sinh của biểu mô ống thận với các sản phẩm vi khuẩn". Miễn dịch lâm sàng và thử nghiệm . 145 (2): 346 Phản56. doi: 10.111 / j.1365-2249.2006.03116.x. PMC 1809678 . PMID 16879256.
  7. ^ Antypas, Haris; Libberton, Ben; Melican, Keira (tháng 10 năm 2014). "Giảm biểu hiện cytokine nền trong các tế bào biểu mô mà không bị thiếu máu". Phương thứcX . 1 : 251 Từ253. doi: 10.1016 / j.mex.2014.10.003. PMC 4473026 . PMID 26150960 . Truy cập 27 tháng 1 2016 .
  8. ^ "Công nghiệp huyết thanh" . Truy cập 22 tháng 2 2013 .

Liên kết ngoài [ chỉnh sửa ]